الأسئلة المتداولة حول ثقافة الخلية الإجابة
Date:2022-07-14 16:15:00 Thursday
Summary: 1. إذا تلقيت قارورة من الخلايا المجمدة ، فهل يمكنني تخزينها في النيتروجين السائل مباشرة؟ في كثير من الحالات ، يمكن إعادة الخلايا التي يتم شحنها على الجليد الجاف (-80 درجة مئوية) إلى النيتروجين السائل ثم إذابتها بسرعة. ومع ذلك ، فإن مثل هذا ال......
1. إذا تلقيت قارورة من الخلايا المجمدة ، فهل يمكنني تخزينها في النيتروجين السائل مباشرة؟ في كثير من الحالات ، يمكن إعادة الخلايا التي يتم شحنها على الجليد الجاف (-80 درجة مئوية) إلى النيتروجين السائل ثم إذابتها بسرعة. ومع ذلك ، فإن مثل هذا العلاج قد يقلل من حيوية الخلية. بالنسبة لبعض خطوط الخلايا الحساسة ، قد يؤدي ذلك إلى جعل عملية استعادة الخلايا أكثر صعوبة. يُعتقد أن هذه الظاهرة ناتجة عن التغيرات في بنية بلورات الجليد داخل الخلايا بسبب التغيرات في درجات الحرارة. لذلك ، يوصى بإذابة الخلايا واستزراعها في أسرع وقت ممكن بعد تلقيها. من الأفضل تقليل وقت التخزين عند -80 درجة مئوية ، ويفضل استخدام درجة الحرارة هذه للشحن فقط. 2. لماذا يجب تخزين الخلايا في الطور الغازي بدلاً من الطور السائل في خزان النيتروجين السائل؟ يتم تخزين الخلايا في مرحلة النيتروجين السائل لتسهيل الاسترداد. في المرحلة السائلة من النيتروجين السائل ، إذا لم يتم إغلاق القارورة المبردة أو تسربها بشكل صحيح ، تكون الخلايا على اتصال مباشر مع النيتروجين السائل ، مما سيؤثر على قابلية الخلايا للحياة بعد الذوبان. 
3. كيفية تغيير الوسط لخلايا التعليق؟ يمكن زراعة الخلايا في التعليق ببساطة عن طريق إضافة وسط جديد (إذا سمحت المساحة بذلك) أو عن طريق فصل الخلايا عن الوسط القديم بالطرد المركزي (100 × جم لمدة 5 دقائق) ، متبوعًا بإعادة تعليق الخلايا الحبيبية في وسط جديد. ومع ذلك ، بالنسبة لمعظم خطوط الخلايا المعلقة ، فإن إضافة الوسط ببساطة هي طريقة أفضل. تتطلب كلتا الطريقتين تحديث الوسيط قبل أن تصل الخلايا إلى أقصى كثافة تشبع لها. تتراوح كثافة تشبع الخلايا بين 3 × 10 5 و 2 × 10 6 اعتمادًا على خط الخلية وظروف الثقافة (الراحة أو الإثارة ، ومستوى الأوكسجين ، وما إلى ذلك). يجب تخفيف الخلايا لخفض تركيزات الخلايا للسماح باستعادة العناصر الغذائية الكافية للحفاظ على الخلايا في النمو اللوغاريتمي. إذا تم تغيير الوسيط ببساطة دون تقليل كثافة الخلية ، فسوف تستنفد الخلايا الوسط بسرعة وتموت. إذا تم تخفيف الخلايا إلى ما دون الحد الأدنى من كثافتها ، فسوف تدخل مرحلة تأخر أو تنمو ببطء شديد أو تموت. يحتوي كل خط خلية معلق على كثافة تشبع مختلفة وفاصل مرور ، لذا فإن تعداد الخلايا اليومي هو أفضل طريقة لمراقبة خط خلية التعليق.
English
عربى
中文简体